Pagtuklas ng mga istraktura ng tisyu, antibodies, at mga pathogens sa pamamagitan ng immunolabeling ay popular, moderno, at tumpak. Ang Immunofluorescence ay tumutukoy sa immunolabeling na may handa na fluorescent antibodies na ginawa upang mamula sa ilalim ng ilaw ng UV. Sa direktang pagtuklas ng immunofluorescence, ang substrate ng pagsubok ay sinusuri nang direkta sa luminescent antibodies, nang walang upstream pangunahing mga antibodies o artipisyal na antigens.
Ano ang direktang pagtuklas ng immunofluorescence?
Tumutukoy sa tumor na antigens sa tisyu ng tumor na maaaring direktang napansin sa pamamagitan ng immunofluorescence. Kaya, posible na malaman kung saan sa katawan ang mayroon metastases ay nagmula sa. Ang direktang pagtuklas ng Immunofluorescence ay isang diagnostic na pamamaraan batay sa mga natuklasan sa immunology, immunostaining at immunohistochemistry. Ang pokus dito ay ang kakayahan ng mga antibodies na magbigkis sa mga tukoy na site sa tisyu o sa mga antigens sa isang suwero. Ang mga site na ito ay epitope. Sa mga diagnostic ng biochemical, mayroong mga artipisyal na antibody o mimetics (isahan: mimetic) na pinapayagan ang pag-label ng mga bono ng antibody-antigen na ito sa pamamagitan ng fluorescence o radioactivity. Ang artipisyal na antibody conjugates sa katunayan ay nagbubuklod sa mga epitope sa isang banda at mayroong isang fluorescent marker sa kaso ng immunofluorescence sa kabilang banda. Ito ay isang kahalili sa paggamit ng mga radioactive marker. Ang espesyal na tampok ng direktang pagtuklas ng immunofluorescence kumpara sa hindi direktang pagtuklas ay ang antibody na nagbubuklod sa epitope ng antigen sa napagmasdan na materyal ay sabay na ang antibody conjugate na may fluorescent marker. Ang mga karagdagang antibodies para sa interposisyon ay hindi kinakailangan para sa direktang pagtuklas. Sa immunofluorescence, fluorescein, na kumikinang sa ilalim ng ilaw ng UV, at ang fluorescein isothiocyanate (FITC) ay ginagamit bilang tina upang mabuo ang mga artipisyal na conjugates ng antibody. Hanggang sa nababasa nito ng medyo kumplikado, ngunit ang mga direktang pagtuklas ng immunofluorescence ay karaniwang mga pamamaraan ng medikal diagnostic ng laboratoryo para sa maraming iba't ibang mga medikal na isyu. Ang mga antibodies na naglalaman ng fluorescent tina ay magagamit na ibenta.
Pag-andar, epekto, at mga target
Ang mga direktang detektor ng Immunofluorescence ay magagamit para sa mga pag-aaral ng tisyu upang mantsahan ang mga tukoy na istraktura sa tisyu. Ngunit mayroon din sila para sa mga solong cell. Doon gumaganap ng malaking papel ang flow cytometry. At sa wakas, may mga immunoassay na binubuo ng solid at likidong mga phase. Ang mga pag-aaral na Immunofluorescence ng mga tisyu ay mahalaga sa lahat sa oncology, ibig sabihin, ang paggamot sa medisina ng kanser. Tumutukoy sa tumor na antigens sa tisyu ng tumor na maaaring direktang napansin sa pamamagitan ng immunofluorescence. Ang mga pagsusuri na ito ng mga sample ng tisyu mula sa mga bukol ay madalas na mahalaga para malaman kung saan sa katawan ang mayroon metastases nagmula, o para din sa pagbuo ng isang paghuhusga kung ang isang tumor ay benign o malignant. Ang pagsusuri ng mga indibidwal na selula na may direktang pagtuklas ng immunofluorescence ay ginagamit upang makahanap ng mga viral antigens, bacterial antigens at iba pang mga epitope. Halimbawa, malalaman ng isa kung ang mga cells ay nahawahan ng isang virus at sa anong yugto ng cycle ng impeksyon ang mga cells. Ang FACS (= Fluorescence-Activated Cell Sorting) ay isang mahusay na paraan ng pag-agos ng cytometry na kung saan ang mga fluorescent na may label na mga cell ay ipinamamahagi sa iba't ibang mga tubo ng pagsubok depende sa uri ng paglamlam. Ang pamamaraang ito ay mahalaga sa immunology, hematology at infectiology. Pinapayagan ng Immunoofluorescence immunoassays na direktang pagtuklas ng mga lason sa kapaligiran, binago ng genetiko na mga organismo at ilang mga additives sa pagkain. Sa pang-eksperimentong pag-setup na ito, palaging may isang solid at isang likidong yugto. Maraming mga pathogens, Kabilang ang AIDS-mga sanhi ng HI virus, maaari ding direktang napansin. Gayunpaman, kapag nakakita ng nakahahawang at autoimmune sakit, ang pakay ay madalas na makakita ng mga antibodies kaysa sa mga antigen. Ito ang pagtatanggol molecule ginawa ng sariling katawan immune system. Ang mga nasabing detection ay hindi direktang pagtuklas ayon sa kahulugan na ipinakita dito, dahil ang mga fluorescent na antibodies ay hindi direktang nag-iisa sa sariling mga antigen ng katawan, ngunit sa mga antigen ng pagpupulong ng pagsubok. Ang mga antigens ng pang-eksperimentong pagpupulong na ito ay naka-link sa mga endogenous na antibodies. Tanging sa mga espesyal na pagtuklas at mga pagsusuri sa kumpirmasyon ay direktang pagtuklas ng immunofluorescence na ginagamit para sa mga karaniwang impeksyon, halimbawa ng HI virus at Chlamydia. Mayroong mga pagsubok para sa maraming iba pang mga sakit. Sa karamihan ng mga sitwasyon, ang hindi direktang pagtuklas ng mga antibodies ay mas mahusay para sa Nakakahawang sakit kasi ang katawan immune system ay may isang likas na kakayahan na matandaan ang mga nakaraang impeksyon. Sa iba pang mga sitwasyon, ang direktang pagtuklas ng mga antigen at hindi direktang pagtuklas ng mga antibodies ay magkakabit sa bawat isa. Ipinakita ng huli na ang isang impeksyon ay naganap dati, samantalang ang nauna ay nagbibigay ng mas tumpak na impormasyon tungkol sa kasalukuyang katayuan ng aktibidad ng pathogen.
Mga panganib, epekto, at panganib
Sa direktang pagtuklas ng immunofluorescence, tulad ng lahat ng pagtuklas ng medikal, dumating ang dalawang mga panganib: Ang peligro ng isang maling positibong resulta at ang panganib ng isang maling negatibong resulta. Maling positibong resulta ay sanhi ng kakulangan sa ginhawa ng sikolohikal at napakalubhang pagkabalisa sa pasyente. Samakatuwid, ang mga karagdagang pamamaraan ng pagsubok ay idinagdag sa mga positibong resulta, lalo na kapag ang diagnosis ay humahantong sa matinding pagbabago sa buhay. Ang panganib ng isang maling negatibong resulta ay ang pasyente ay hindi natutunan sa oras tungkol sa banta sa kanyang sarili kalusugan at marahil kahit sa kalusugan ng publiko. Samakatuwid, mabuting gumawa ng maraming pagsasaliksik at gumawa ng isang malaking bilang ng mga iba't ibang mga direktang deteksyon ng immunofluorescence na handa nang ibenta at ialok sa kanila. Kasama ang iba pang direkta at hindi direktang mga pamamaraan ng pagtuklas ng mga sakit at pathology, pinapataas nito ang katumpakan ng diagnosis. Ang mga direktang pagtuklas ay batay sa antibody conjugate, na sa isang banda ay nagbubuklod sa mga epitope ng mga antigens at sa kabilang banda ay nagdudulot din ng fluorescence nang sabay. Ang nasabing produkto ay samakatuwid ay ginagamit lamang sa isang uri ng pamamaraan ng pagsubok at hindi ginagamit para sa iba pang mga uri ng pagsubok. Ito ay isang mahalagang, pagkakaiba-iba sa pamamaraan mula sa hindi direktang pagtuklas, kung saan ang pangunahing mga antibodies ay ginagamit paitaas ng mga fluorescent na antibodies para sa epitope binding. Ang antibody conjugate ay angkop para sa iba't ibang mga pagsubok. Ang pagkakaiba sa pamamaraang ito ay naiiba mula sa pagkakaiba-iba ng medikal sa pagitan ng hindi direktang pagtuklas ng mga antibodies at direktang pagtuklas ng mga antigen.
