Immunoelectrophoresis ay ginagamit para sa pagtuklas ng laboratoryo ng diagnostic ng monoclonal antibodies sa isang pasyente dugo. Monoclonal antibodies ay nagmula sa parehong cell at nakadirekta laban sa parehong mga antigen. Para sa kadahilanang ito, itinuturing silang pathologic at, kapag napansin, ay nagpapahiwatig ng mga sakit tulad ng Waldenström disease.
Ano ang immunoelectrophoresis?
Immunoelectrophoresis ay ginagamit para sa pagtuklas ng laboratoryo ng diagnostic ng monoclonal antibodies sa isang pasyente dugo. Ang mga ion ay may pagkakaiba-iba ng paggalaw. Ang kaugaliang kadaliang kumilos na ito ang bumubuo sa batayan ng mga pamamaraan ng electropheresis. Ang mga pamamaraang ito ay naghihiwalay ng magkakaibang mga sangkap mula sa bawat isa gamit ang mga electric field at gravity. Ang isang kilalang pamamaraan mula sa larangan ay immunoelectropheresis. Ito ay isang husay na pamamaraang diagnostic na ginagamit upang makita mga monoclonal antibodies. Ang mga antibodies ay mga sangkap na protina na may proteksyon sa immunologically ng isang tiyak na linya ng cell. Monoclonal antibodies lahat nagmula sa parehong B lymphocyte at naaayon na nakadirekta laban sa isang solong epitope. Ang anumang natural na tugon sa immune laban sa pagsalakay ng mga antigen ay tumutugma sa isang polyclonal na tugon at sa gayon ay nakadirekta laban sa iba't ibang mga epitope. Ang isang monoclonal immune response samakatuwid ay nagbibigay ng katibayan ng mga proseso ng pathological body. Monoclonal antibodies magbuklod ng iba molecule may mataas na pagtutukoy. Ang pagkakagapos na ito ay maaaring napansin ng immunoelectrophoresis. Ang pamamaraan ay isang husay na pamamaraan ng diagnostic ng laboratoryo at binubuo ng dalawang uri ng mga pamamaraan, serum electrophoresis at immunodiffusion.
Pag-andar, epekto, at mga layunin
Pinagsasama ng Immunoelectrophoresis ang pamamaraan ng serum electrophoresis na may immunodiffusion. Ang suwero ng pasyente ay inilalagay sa isang agarose gel o cellulose acetate film. Ang isang control serum ay inilapat din. Ang application ay sinusundan ng electrophoretic paghihiwalay ng mga sample. Antisera, IgG, IgA, IgM, acetic acid para sa normal na electrophoresis at kappa, at lambda ay inilalapat sa pagitan ng mga linya ng paghihiwalay. Nagtatakda ito ng isang reaksyon sa mga antibodies ng serum ng pasyente, na bumubuo ng mga linya ng pag-ulan. Nakasalalay sa ginamit na antiserum at sa posisyon at hugis ng mga indibidwal na linya, maaaring makuha ang mga konklusyon tungkol sa immunoglobulins na may kappa o lambda light chain na nilalaman. Sa kaso ng isang lambda band, naroroon ang mga libreng ilaw na kadena ng mga antibodies. Gamit ang bihirang IgE at IgD, nagbibigay ang laboratoryo ng karagdagang katibayan na nagpapahintulot sa tumpak na pagpapasiya ng immunoglobulins. Ang isang pamamaraan ng immunodiffusion electrophoresis ay nagaganap ayon kina Pierre Grabar at Curtis Williams at tumutugma sa isang kumbinasyon ng agarose gel electrophoresis ng proteins at isang pagsasabog ng antibody. Una, nagaganap ang agarose gel electrophoresis. Kasunod, ang mga nakapaloob na mga antibodies ay nagkakalat laban sa mga banda ng mga antigen at sa gayo'y nagbubunga ng mga namumuong arko. Ito ay dapat na makilala mula sa Laurell's Rocket immunoelectrophoresis, na tumutugma sa electrophoresis ng proteins sa loob ng isang agarose gel, bawat isa ay naglalaman ng mga antibodies sa isang tukoy walang halo. Naglalaman ang gel ng isang bahagyang pangunahing buffer na nagpapahintulot lamang sa mga antigens na lumipat, na itulak ang karamihan ng mga antibodies sa isoelectric point sa pamamagitan ng pagkakalantad sa bahagyang pangunahing pH hanggang sa tumigil sila sa paggalaw ng electrophoretically. Sa simula ng isang Rocket immunoelectrophoresis, mayroong labis na antigen, kaya nabuo ang mga soluble na antigen-antibody complex. Sa panahon ng electrophoresis, ang karagdagang pagbubuklod ay nangyayari sa pagitan ng mga antigens at karagdagang mga antibodies. Sa punto ng pagkapareho, ang mga immunoprecipitates ay nabuo sa ganitong paraan, na kahawig ng mga mala-rocket na pigura na may proporsyonal na taas sa antigen walang halo. Ang taas ng namuo ay sinusukat upang suriin ang pagsusuri.
Mga panganib, epekto, at panganib
Ang pagtuklas ng mga monoclonal antibodies ay partikular na mahalaga para sa pagsusuri ng maraming myeloma at sakit na Waldenstrom. Ang nakuhang deteksyon ay nagpapahiwatig ng isang malignant pagkabulok ng mga immune cell. Ang maramihang myeloma ay tumutugma sa a kanser ng utak ng buto nailalarawan sa pamamagitan ng malignant paglaganap ng mga cell na gumagawa ng antibody sa plasma. Ang mga plasma cell na ito ay gumagawa ng mga antibodies at kanilang mga fragment. Ang mga malignant na plasma cell ay palaging nagmula sa isang karaniwang progenitor cell at sa gayon ay magkapareho ng genetiko. Eksklusibo silang gumagawa ng mga monoclonal antibodies. Ang pagkasama ng sakit na ito ay maaaring tumutugma sa isang precancerous yugto, ngunit maaari ring maabot ang isang napaka-malignant yugto na mabilis na nakamamatay nang walang paggamot. Ang mga sintomas ng sakit ay nagreresulta mula sa nakakapinsalang paglaki ng mga cell o mula sa mga antibodies at mga fragment ng antibody. Kasama ang pinakakaraniwang mga sintomas sakit sa buto, pagkabulok ng buto, at kusang bali ng buto. Kaltsyum antas sa dugo ay madalas na nakataas. Bilang karagdagan, ang mga hindi normal na antibodies ay madalas na sumuko sa mga tisyu at maging sanhi ng pagkasira ng organ, na maaari mamuno sa mga pagpapakita tulad ng klase pagkabigo o may kapansanan sa daloy ng dugo. Ang sakit na Waldström ay isa ring malignant na sakit sa tumor. Mas partikular, ito ay isang nakakapinsala lymphoma sakit na inuri bilang isang mabagal na progresibo at halos walang sintomas na B-cell na hindiAng lymphoma ni Hodgkin. Sa karamihan ng mga kaso, ang mga abnormal na paggawa ng monoclonal IgM ay maaaring napansin sa sakit, na sanhi ng mga aktibidad ng malignant lymphoma mga cell Ang sakit na Waldenström ay halos kapareho ng maraming myeloma sa mga katangian nito, ngunit kadalasang nagpapakita ng isang mas kanais-nais na kurso. Karamihan sa mga pasyente na may sakit na Waldenström ay higit sa lahat na walang sintomas hanggang sa diagnosis. Ang iba pang mga pasyente ay nagpapakita ng maagang sintomas tulad ng nonspecific pagkapagod o paligid neuropathies na nagreresulta mula sa pagtitiwalag ng monoclonal IgM sa loob ng myelin upak. Kahit na ang maliit na halaga ng IgM ay maaaring maging sanhi polyneuropathy. Sa ibang mga pasyente, polyneuropathy ay hindi nangyayari kahit na may mataas na antas. Bilang karagdagan, ang mga hindi tiyak na sintomas tulad ng lagnat, hindi ginustong pagbaba ng timbang, o pagpapawis sa gabi ay maaaring mangyari. Sakit ng buto ay katangian din. Dahil sa labis na produksyon ng IgM, ang dugo ay naging hyperviscous, upang ang mga sintomas sa itaas ay maaaring maiugnay sa mga ng isang hyperviscosity syndrome. Ito pagkahilig ng pagdurugo nagpapakita ng sarili sa karamihan ng mga kaso nang madalas nosebleeds, ulo, isang pangkalahatang pakiramdam ng karamdaman o malabo na paningin at mga reklamo ng acoustic. Upang makita ang mga malignancies ng ganitong uri, ang immunoelectropheresis ay matagal nang naging isang pamantayan sa diagnostic na pamamaraan.
