Ang fluorescence in situ hybridization (FISH) ay isang pamamaraang pag-screen ng genetic para sa pagtuklas ng DNA (deoxyribonucleic acid) sa nuclei ng mga indibidwal na cells.
Ang pamamaraang ito ay nagsasangkot ng paggamit ng mga tukoy na probe ng DNA na maaari lamang magbigay ng impormasyon tungkol sa mga rehiyon ng genomic kung saan tukoy ang ginamit na probe.
Mga Indikasyon (mga lugar ng aplikasyon)
- Paghinala ng numerong chromosomal aberration:
- Ang pagtuklas ng mga abnormalidad na bilang ng chromosomal (hal, trisomy 21).
- Para sa dami ng mosaic para sa chromosomal aberrations (hal., Sa Ullrich-Turner syndrome).
- Pagtuklas para sa microdeletions (hal., Monosomy 22q11.2).
- Ang pagtuklas ng mga pagkakamali ng chromosomal (hal. talamak na lymphocytic leukemia (CLL), hindi Hodgkin lymphoma).
Ang mga pahiwatig sa itaas ay sinuri ng interphase FISH (tingnan ang "The Laboratory Procedure" para sa mga detalye).
ang pamamaraan ay
Kinakailangan ang materyal
- Heparin dugo (minimum 1-2 ml)
Paghahanda ng pasyente
- Hindi kinakailangan
Nakagagambalang kadahilanan
- Walang alam
Ang pamamaraan ng laboratoryo
Ang fluorescence in situ hybridization (FISH) ay nagsasangkot ng paggamit ng fluorescently na may label na DNA probes (FISH probes). Maaari itong maiugnay sa isang tukoy na site ng DNA sa isang chromosome, na tinatawag na hybridization. Sa o matapos na pagbuklod ng fluorescently na may label na probe, ang pagsasagawa ay maaaring isagawa gamit ang isang microscope. Sa prosesong ito, natutukoy ang bilang ng mga signal ng fluorescence sa loob ng interphase nuclei. Bukod dito, isang pagtatasa ng lokasyon (hal. Translocation / shift ng lokasyon / sa isa pang chromosome) sa metaphase chromosomes ay posible.
Kapag naiiba ang fluorescent tina ay ginagamit para sa iba't ibang mga target na DNA sa pamamaraan ng FISH, ito ay tinukoy bilang multicolor FISH. Pinapayagan nito ang kumpletong visualization ng genome.
Sa ilang mga kaso, ang pagsisiyasat ng DNA ay hindi direktang may label na isang fluorescent na tina, na tinatawag na isang hindi direktang pamamaraan. Sa halip, ito ay may label na may mga sangkap tulad ng biotin o digoxigenin. Ang pamamaraang ito ay itinuturing na mas kumplikado ngunit mas sensitibo.
