Ang pagsubok ng ELISA ay isang pagsusuri sa medikal na laboratoryo, sa panahon ng pagganap kung saan nangyayari ang tinatawag na reaksyon ng antigen-antibody. Ang iba`t ibang mga antigen ay maaaring masubukan na may papel sa pantao o beterinaryo na gamot. Ang mga accredited na institute ng laboratoryo lamang ang naatasan na magsagawa ng pagsubok sa Alemanya.
Ano ang pamamaraan?
Sa loob ng mga pagsusuri sa medikal na laboratoryo, ang pagsusulit ng ELISA ay kabilang sa tinatawag na mga pamamaraang immunological. Sa pamamagitan ng pamamaraan ng pagsubok, protina molecule ay maaaring napansin sa medyo iba likido sa katawan. Ang ELISA ay ang pagpapaikli para sa Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay. Samakatuwid ito ay isang pagtatalaga ng wikang Ingles na, subalit, naitatag sa paggamit ng medikal na Aleman. Ang pagsusulit ng ELISA ay kabilang sa tinatawag na mga pamamaraang immunological sa loob ng mga pagsusuri sa medikal na laboratoryo. Ang pamamaraan ng pagsubok ay maaaring magamit upang makita ang protina molecule sa iba't ibang uri ng likido sa katawan. Ang pagtuklas ng mga ito molecule pinapayagan ang pagguhit ng mga konklusyon tungkol sa ilang mga sakit o larawan ng klinikal, na ang dahilan kung bakit din nakasalalay ang mga doktor sa kanilang diyagnosis sa resulta ng naturang pagsusulit sa ELISA. Samakatuwid, ang pamamaraang pagsubok ay napakahalaga sa pang-araw-araw na kasanayan sa klinikal, maging sa isang outpatient o setting ng inpatient. Ang kaukulang likido sa katawan, halimbawa buo dugo o likido mula sa joints, ipinadala kaagad sa laboratoryo matapos makolekta mula sa pasyente. Kadalasan ito ay medyo kagyat na mga sample, dahil ang katutubong materyal ay itinuturing na sensitibo at dapat suriin sa lalong madaling panahon. Ang tinatawag na overstored na mga sample ay maaari mamuno sa maling negatibong resulta dahil ang pathological proteins na napansin ay nabawasan o ganap na napasama sa pansamantala. Kaya, ang tinaguriang preanalytic ay may mahalagang papel sa ELISA; kahina-hinala o negatibong mga resulta ay dapat na ulitin ulit kung nararapat na mga klinikal na sintomas ay naroroon.
Pag-andar, epekto, at mga layunin
Para sa tamang pagganap ng pagsubok sa isang kinikilalang medikal na laboratoryo, ang mga tubo sa pagsubok at mga tinatawag na microtiter plate ay ganap na kinakailangan. Ang mga plate na may pinong semi-concave indentations ay gawa sa espesyal na plastik at ang bawat isa ay pinahiran ng isang napaka-tiyak na antibody. Kung ang antigen na napansin ay naroroon sa isang likido sa katawan na susuriin, kung gayon ang isang tukoy na antigen-antibody na reaksyon ay nangyayari ayon sa tinaguriang lock-and-key na prinsipyo. Ang sample na materyal ay maaaring ipasok sa mga plato alinman sa manu-mano ng mga tauhan ng laboratoryo na gumagamit ng mga pipette o ganap na awtomatiko. Sa mga modernong institute ng medikal na laboratoryo, ang mga ganap na awtomatikong sistema lamang ang ginagamit para sa mga diagnostic ng ELISA. Gayunpaman, dapat itong subaybayan ng mga may kasanayang tauhan, mga katulong sa medikal-teknikal na laboratoryo. Ang tinaguriang panloob at panlabas na kontrol sa kalidad ay responsibilidad din ng mga kawani ng laboratoryo, higit sa mga medikal na kawani para sa gamot sa laboratoryo, Nakahahawang sakit epidemiology at microbiology. Matapos ang unang pagsubok na pangkat, ie pagkatapos ng materyal ay nai-pipett sa mga plato, ang mga tukoy na antigen sa sample, kung mayroon, ay nakagapos na sa antibodies sa plato ng plastik. Pagkatapos ay isinasagawa ang isang paghuhugas na may physiological saline upang alisin ang mga nakakagambalang kadahilanan tulad ng mga hindi ginustong antigens o proteins mula sa paghahanda. Napakahalaga ng hakbang na ito upang maiwasan ang maling mga positibong reaksyon. Ang maling positibong resulta na binibigyang kahulugan ng laboratoryo ay maaaring magkaroon ng nakamamatay na kahihinatnan para sa isang pasyente. Sa pangalawang hakbang ng pagsubok, idinagdag ang isa pang antibody na isinama sa isang enzyme. Ang may label na antibody na ito ay nagbubuklod din sa antigen. Sa isang pangatlo at pangwakas na hakbang, ang isang espesyal na pangulay ay idinagdag sa isang tinukoy na halaga, na kung saan ay napasama sa isang mas malaki o mas kaunting lawak ng mga residu ng enzyme na mayroon pa rin. Ang nasabing enzyme lamang ang maaaring mapasama, na kung saan ay hindi dating nakatali sa antigen kasama ang antibody. Ang libreng enzyme ay magagawang i-cleave ang idinagdag na tina. Ang eksaktong dami ng cleaved dye ay maaaring tumpak na matukoy sa ibang pamamaraan ng laboratoryo, ang tinatawag na photometry. Nagbibigay-daan ito sa mga tumpak na konklusyon na iginuhit kung ang antigen ay naroroon sa isang sample na materyal sa lahat at, kung gayon, kung magkano. Ginamit ang pagsubok ng ELISA hindi lamang para sa paunang pagsusuri o upang kumpirmahing pinaghihinalaan ang mga diagnosis ng ilang mga sakit at klinikal na larawan, ngunit din upang masubaybayan ang kanilang pag-unlad. Kung ang antigen walang halo sa pagsubok ay nagiging mas mababa sa panahon ng kurso ng terapewtika, ang therapy ay itinuturing na matagumpay.
Mga panganib, epekto, at panganib
Ang pagsubok ng ELISA ay nakakakuha ng nagbibigay-kaalamang halaga na pangunahin sa pamamagitan ng pagtuklas ng mga antigenic na istraktura sa mga likido sa katawan. Pinapayagan ng pagsubok ang isang tinatawag na husay, ngunit din semi-dami at dami ng pahayag tungkol sa pinaghihinalaang pagkakaroon ng ilang mga antigen sa mga likido sa katawan. Buo dugo hindi maaaring gamitin para sa pagsubok, serum lamang ng dugo. Isang direktang pagsusuri sa pasyente, halimbawa mula sa maliliit na ugat dugo ng kamay, samakatuwid, tulad ng ilang iba pang mga serological test, hindi posible hanggang ngayon. Sa gamot ng tao, ang pagsubok ng ELISA ay pangunahing ginagamit upang makita ang mga antigen sa impeksyon sa bakterya, viral o fungal. Bilang karagdagan, lahat ng positibong resulta ng sakit sa atay ang serolohiya ay nasuri muli gamit ang isang pagsusulit sa ELISA bilang pamantayan. Tiyak hormones, halimbawa ang pagbubuntis Ang hormon HCG, maaari ring matukoy sa pagsubok ng ELISA. Kung ang ilang mga komplikasyon ay nangyayari habang pagbubuntis, tumpak na kaalaman ng walang halo ng hormon ng pagbubuntis sa dugo ay kapaki-pakinabang sa diagnostic at therapeutically. Ang isa pang pahiwatig para sa pagsubok ay ang pagtuklas ng mga tinatawag na paraprotein sa ihi, habang nangyayari ito, halimbawa, sa iba't ibang sakit sa bukol, tulad ng maraming myeloma. Ang pagsubok sa ELISA ay ginaganap pa rin sa maraming mga laboratoryo ngayon, ngunit itinuturing na lipas na sa panahon ng mga eksperto. Ang reaksyon ng immune na isinama sa enzymes sa pagsubok ng ELISA ay lalong napalitan ng mga nagdaang taon sa pamamagitan ng radioactively na may label antibodies, na nagbibigay ng isang mas mahusay na bilang ng resulta ng pagsukat. Ang mga pagsubok na ito ay tinatawag ding RIA, Radio Immunabsorbent Assay. Ang iba pang mga tiyak na pagsulong ng ELISA ay mga pamamaraang kemikal na ilaw tulad ng luminescence o fluorescence.
